货源介绍

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　　中文名称：大肠埃希氏菌C3000

　　拉丁名称：Escherichia coli

　　模式菌株：否

　　其它保藏中心编号：=ATCC 15597

　　来源历史：←中国食品药品检定研究院

　　收藏时间：2021/8/13

　　原始编号：C-3000

　　特征特性：菌体短杆状，单个或成对排列，革兰氏阴性，无芽胞。

　　参考用途：噬菌体宿主

　　生物危害程度：四类

　　致病对象：无

　　分离基物：来源于大肠埃希氏菌K12

　　培养基编号：

　　培养基名称：营养肉汁琼脂

　　培养基成分：蛋白胨5.0g，牛肉浸取物3.0g，NaCl 5.0g，琼脂15.0g，蒸馏水1.0L，pH7.0。[注]培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4・H2O，则有利于产生芽孢。推荐使用商品化成品培养基。

　　培养温度：36℃

　　需氧类型：好氧

　　注意事项

　　1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，准备1支含有5-10ml液体培养基的试管和2个平板；用酒精灯灼烧顶部后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子敲碎；吸取0.5ml液体培养基打入冻干管充分溶解后重新打回液体试管中混匀；吸取0.2ml菌悬液打入平板涂布混匀，重复2次获得2个平板；将液体试管和平板全部置于培养条件下培养，经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间；若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为2-25年；

　　5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降或者不活等情况，请在收到后2个月内联系，逾期不予受理；

　　6）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

　　7）西林瓶开封：用75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖，注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞，用75%酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入0.5ml适宜的液体培养基复溶冻干粉末。

　　8）安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

　　9）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。