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智立中特细胞库EB-3人Burkitt淋巴瘤细胞

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所在地区:湖北 时间:2023-12-27【加入收藏夹】【关闭

货源介绍

  质粒载体网主要对载体质粒类目下产品展示,不仅提供质粒、菌种、细胞及培养基等相关产品订购,同时可以为客户提供质粒构建、载体设计及菌种细胞鉴定,还对包括ATCC、JCM、KCTC等进口微生物资源提供订购及保藏服务。

  细胞名称EB-3(人Burkitt's淋巴瘤细胞)

  种属人

  年龄(性别)男;3岁

  组织来源

  生长特性悬浮

  细胞形态淋巴母细胞样

  背景描述EB-3细胞源自一名3岁患有Burkitt's淋巴瘤的黑人男孩的B淋巴细胞,EBNA阳性。

  生长培养基RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

  培养条件气相:空气,95%;CO2,5%温度:37℃

  细胞处理:

  1)冻存细胞的复苏:

  将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

  2)细胞传代:如果细胞密度达70%-90%,即可进行传代培养。

  该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法:

  1.收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。

  2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

  3.将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

  3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

  智立中特(武汉)生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于EB-3(人Burkitt's淋巴瘤细胞)报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应EB-3(人Burkitt's淋巴瘤细胞)外,本公司还可为您提供提供进口微生物菌种、各类细胞资源,原装进口菌种,质粒载体。公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。

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