货源介绍

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　　MSTO-211H细胞（提供STR鉴定报告）

　　（1）英文名称：MSTO-211H

　　（2）中文名称：人肺癌细胞

　　（3）细胞描述：MSTO-211H细胞株是1985年从一位肺二相间皮瘤患者的胸水中建株的。这个病人接受过多种药物联合前期化疗。MSTO-211H细胞具有高亲和力的EGF结合位点，并表达神经元特异性烯醇酶(NSE)及人绒毛膜促性腺激素(HCG)的α与β亚基。未检测到左旋多巴胺脱羧酶(DDC)，邦巴辛与神经tensin。细胞过表达c-myc原癌基因，并没有观察到基因重排或扩增。V-src,v-abl,v-erbB,c-raf1,Ha-ras,Ki-ras,和N-ras的表达呈阳性。未检测到N-myc,L-myc,c-myb。在本库通过STR鉴定结果正确。

　　（4）规格：T25方瓶或1ml冻存管

　　（5）细胞数量：1×10^6

　　（6）组织来源：人肺癌

　　（7）生长方式：贴壁生长

　　（8）细胞形态：上皮型

　　（9）培养液：RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

　　（10）培养条件：37℃，5%CO2

　　（11）运输方式：常温运输（T25方瓶）或干冰运输（冻存管）

　　细胞处理：

　　1）冻存细胞的复苏：

　　将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

　　2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

　　对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

　　1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

　　2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

　　3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

　　3）细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

　　下面T25瓶为例；

　　1.细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.

　　2.1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞，按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

　　3.将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。